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組織型纖溶酶原激活劑酶聯免疫試劑盒?操作步驟

時間:2021-10-12 瀏覽次數:36

組織型纖溶酶原激活劑酶聯免疫試劑盒操作步驟:


1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘。

泛素連接酶E3A(UBE3A)重組蛋白

防御素β103B(DEFβ103B)重組蛋白

防御素β112(DEFβ112)重組蛋白

防御素β113(DEFβ113)重組蛋白

防御素β124(DEFβ124)重組蛋白

防御素β126(DEFβ126)重組蛋白

防御素β131(DEFβ131)重組蛋白

防御素β2(DEFβ2)重組蛋白

分泌跨膜蛋白1(SECTM1)重組蛋白

封閉蛋白9(CLDN9)重組蛋白

脯氨酸/絲氨酸豐富卷曲螺旋蛋白1(PSRC1)重組蛋白

脯氨酰羧肽酶(PRCP)重組蛋白

輔肌動蛋白α2(ACTN2)重組蛋白

輔肌動蛋白α3(ACTN3)重組蛋白

鈣/鈣調蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱγ(CAMK2γ)重組蛋白

鈣非依賴性磷脂酶A2(iPLA2)重組蛋白

鈣結合蛋白(CR)重組蛋白

鈣聯蛋白(CNX)重組蛋白

鈣黏蛋白26(CDH26)重組蛋白

干擾素α(IFNα)重組蛋白

干擾素α2(IFNα2)重組蛋白

干擾素α4(IFNα4)重組蛋白

干擾素γ(IFNγ)重組蛋白

干擾素誘導內質網關聯病毒抑制蛋白(Viperin)重組蛋白


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